Orienta??es para o diagnóstico de influenza em suínos

摘要

Este trabalho descreve a colheita adequada de amostras, as técnicas/procedimentos disponíveis para o diagnóstico de influenza A em suínos, assim como os resultados e suas respectivas interpreta??es, para auxiliar médicos veterinários de campo na identifica??o dessa doen?a. Em suínos vivos, as amostras adequadas s?o: secre??o nasal, fluido oral e sangue (soro). Para suínos mortos, colher preferencialmente amostras de pulm?o com consolida??o cranioventral. Secre??o nasal e fragmentos de pulm?o refrigerado s?o utilizados para detectar partícula viral viável (isolamento viral - IV) ou ácido nucleico viral (RT-PCR convencional e RT-PCR em tempo real). As amostras n?o devem ser congeladas, pois o vírus é inativado a -20°C. A caracteriza??o molecular dos isolados é feita pela análise filogenética obtida pelo sequenciamento de DNA. O soro é utilizado para a detec??o de anticorpos (Acs) por meio do teste da inibi??o da hemaglutina??o e ELISA. O fluido oral pode ser utilizado para detec??o de anticorpo (ELISA) ou de vírus. Fragmentos de pulm?o fixados em formol a 10% s?o examinados microscopicamente para identificar pneumonia broncointersticial e para detec??o de antígeno viral pela imuno-histoquímica (IHQ). Para o sucesso do diagnóstico, as amostras devem ser colhidas de suínos que est?o preferencialmente na fase aguda da doen?a, para aumentar as chances de detec??o viral. As melhores op??es para o diagnóstico de influenza A em suínos vivos s?o RT-PCR e isolamento viral de amostras de swab nasal ou fluido oral. Pulm?o para análise por RT-PCR, isolamento viral ou IHQ é a amostra de escolha em suínos mortos. Testes sorológicos têm valor diagnóstico limitado e s?o utilizados apenas para determinar o estado imune do rebanho, n?o indicando doen?a clínica, pois os Acs s?o detectados 7-10 dias pós-infec??o (fase subaguda). O diagnóstico de influenza é importante para avaliar o envolvimento desse agente no complexo de doen?a respiratória suína. Além disso, o isolamento do vírus influenza é essencial para o monitoramento dos principais subtipos circulantes em uma determinada regi?o ou país, assim como para a detec??o de novos rearranjos virais, já que influenza é considerada uma zoonose.