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Identificación de híbridos de limón mexicano mediante marcadores moleculares SSR

机译:使用SSR分子标记鉴定墨西哥柠檬杂种

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摘要

Resumen El desarrollo de variedades tolerantes puede ayudar a enfrentar y reducir los impactos de enfermedades que amenazan al cultivo de limón mexicano [Citrus aurantifolia (Christm) Swingle]. Se han generado plantas hibridas interespecíficas e intergenéricas, en busca de genotipos con resistencia o mayor tolerancia a VTC, HLB y antracnosis. Debido a que la mayoría de los cítricos son apomícticos y poliembriónicos se requiere la identificación de plantas híbridas por medio de técnicas tales como los marcadores genéticos moleculares. El objetivo del estudio fue identificar híbridos de limón mexicano mediante marcadores moleculares denominados microsatélites (SSR). Se utilizó una población de 203 individuos de cruzas realizadas de 2009 a 2012, en el Campo Experimental Tecomán-INIFAP. El ADN genómico se realizó de acuerdo con el método CTAB 2%. La reacción de PCR se hizo con un volumen de 20μl conteniendo 10 μl de iTaq? Universal Probes supermix y 2.5 μl de cada iniciador Forward y Reverse. Los iniciadores utilizados fueron TAA41, TAA45, cAGG9 y TAA52. Los productos amplificados, se analizaron en gel de poliacrilamida al 8% y se ti?eron con nitrato de plata al 0.2%. La identificación de plantas hibridas se realizó mediante la comparación de bandas producidas por los híbridos con los progenitores. Los cuatro iniciadores permitieron la identificación de plantas híbridas. El mayor número de plantas identificadas se obtuvieron con los iniciadores TAA45 y cAGG9 con 145 y 130 respectivamente. La identificación de híbridos de la población en estudio a través del análisis de marcadores moleculares, permitirá que los programas de mejoramiento genético sean eficientes, que implica la obtención de un gran número de plántulas derivadas de las cruzas realizadas.
机译:摘要耐性品种的发展可以帮助面对和减少威胁墨西哥柠檬[Citrus aurantifolia(Christm)Swingle]作物的疾病的影响。为了寻找对VTC,HLB和炭疽病具有抗性或更大耐受性的基因型,已经产生了种间和种间杂种植物。由于大多数柑橘类水果是无融合生殖和多胚的,因此需要通过分子遗传标记等技术鉴定杂交植物。该研究的目的是使用称为微卫星(SSR)的分子标记物鉴定墨西哥柠檬的杂种。 Tecomán-INIFAP实验场使用了从2009年到2012年进行的203个人的杂交。根据CTAB 2%方法制备基因组DNA。 PCR反应的体积为20 µl,其中包含10 µl iTaq?。通用探针超级混合,每个正向和反向引发剂为2.5μl。使用的引物是TAA41,TAA45,cAGG9和TAA52。在8%聚丙烯酰胺凝胶上分析扩增产物,并用0.2%硝酸银染色。通过将杂种产生的条带与亲本进行比较来鉴定杂种植物。四种引物可以鉴定杂种植物。分别以145和130的TAA45和cAGG9引物获得的鉴定植物数量最多。通过分子标记分析来鉴定所研究种群的杂种,将使遗传改良程序更加有效,这意味着从杂交中获得大量幼苗。

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