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Detección de Mycobacterium tuberculosis mediante la reacción en cadena de la polimerasa en una población seleccionada del noroccidente de México

机译:通过聚合酶链反应检测墨西哥西北部特定人群的结核分枝杆菌

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摘要

Este estudio compara la detección de Mycobacterium tuberculosis mediante baciloscopia (tinción de Ziehl-Neelsen), cultivo en medio de L?wenstein-Jensen y reacción en cadena de la polimerasa (RCP) realizada con ADN extraído directamente de distintos tipos de muestras. Se analizaron 252 muestras (114 de esputo, 96 de orina, 15 de LCR y 27 de otros tipos) de 160 pacientes con sospecha de tuberculosis en cualquiera de sus formas que acudieron al Laboratorio de Patología Clínica del Hospital de Especialidades del Centro Médico Nacional de Occidente del Instituto Mexicano del Seguro Social. En todos los casos se realizó tinción de Ziehl-Neelsen, cultivo en medio de L?wenstein-Jensen y amplificación por RCP de un segmento de 285 pares de bases específico del complejo M. tuberculosis. De las 252 muestras, 18 fueron positivas para micobacterias no tuberculosas en el cultivo. De las 234 restantes, 12 (5,1%) fueron positivas en la RCP y el cultivo, 174 (74,4%) negativas en ambas pruebas, 47 (20,1%) positivas en la RCP y negativas en el cultivo y 1 (0,4%) negativa en la RCP y positiva en el cultivo; tomando el cultivo como prueba de referencia, la RCP proporcionó una sensibilidad de 92,3%, una especificidad de 78,7%, un valor predictivo positivo de 20,3% y un valor predictivo negativo de 99,4%. El límite de detección de la RCP en ADN extraído de cultivo fue de 10 fg (equivalente a 4 ó 5 micobacterias). También en comparación con el cultivo, la RCP identificó correctamente a la totalidad de las micobacterias del complejo M. tuberculosis. Tomando como prueba de referencia el cultivo, al analizar únicamente las muestras de esputo, la RCP directa proporcionó una sensibilidad de 90,9%, una especificidad de 89,5%, un valor predictivo positivo de 52,6% y un valor predictivo negativo de 98,7%. La RCP es una técnica sensible y específica para detectar el complejo M. tuberculosis en muestras tanto positivas como negativas en la baciloscopia. Un procedimiento controlado de RCP permite establecer o excluir el diagnóstico de tuberculosis en un tiempo que se reduce de más de tres semanas a tan solo 24 a 48 horas, lo cual resulta particularmente útil cuando es necesario un diagnóstico temprano para establecer el pronóstico del paciente o en casos de transplante de órganos.
机译:这项研究比较了通过涂片显微镜检查(Ziehl-Neelsen染色),在L?Wenstein-Jensen培养基中培养以及用直接从不同类型样品中提取的DNA进行的聚合酶链反应(PCR)对结核分枝杆菌的检测。总共252份样本(114份痰,96份尿液,15份CSF和27份其他类型的样本)从160例任何形式的疑似结核病患者中进行了分析,这些患者曾就诊于墨西哥国立中央医院临床病理实验室墨西哥社会保障研究所西边。在所有情况下,都进行了Ziehl-Neelsen染色,在L2 Wenstein-Jensen培养基中的培养以及对结核分枝杆菌复合物特异的285个碱基对的片段的PCR扩增。在252个样本中,有18个在培养中非结核分枝杆菌呈阳性。在其余的234个样本中,PCR和培养阳性的有12个(5.1%),两个测试都阴性的有174个(74.4%),PCR阳性的有47个(20.1%),培养阴性。 PCR阴性,培养阳性1(0.4%);以培养物为参考测试,PCR的灵敏度为92.3%,特异性为78.7%,阳性预测值为20.3%,阴性预测值为99.4%。从培养物中提取的DNA中PCR的检测限为10 fg(相当于4或5分枝杆菌)。同样与培养物相比,PCR正确地鉴定了结核分枝杆菌复合体的所有分枝杆菌。以培养为参照,仅对痰液样本进行分析时,直接PCR的灵敏度为90.9%,特异性为89.5%,阳性预测值为52.6%,阴性预测值为。为98.7%。 CPR是一种在涂片显微镜下检测阳性和阴性样品中结核分枝杆菌复合物的灵敏且特异的技术。受控的CPR程序可使结核病的诊断从3周以上减少到24至48小时不等的时间得以建立或排除,这在需要早期诊断来确定患者的预后或恢复时特别有用。如果是器官移植。

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