xpression of recombinant buck (Capra hircus) spermadhesinin a prokaryotic system

摘要

(xpress?o da espermadesina recombinante de bode (Capra hircus) em sistema procariótico). A baixa eficiência de purifica??o e a incompleta caracteriza??o das espermadesinas de bode (Bdhs) nos levou a estabelecer um sistema efetivo para produzir as Bdhs recombinantes (rBdhs). O cDNA da Bdh-4 foi inserido no plasmídeo de express?o procariótico pTrcHis TOPO para produzir uma proteína de fus?o His6 em células de E.coli Top10. Os clones recombinantes foram crescidos em meio contendo ampicilina, amplifica??o por PCR e sequenciamento de nucleotídeos. A síntese da proteína recombinante foi monitorada por SDS-PAGE seguida por imunobloting usando anticorpo monoclonal anti-His. A express?o da rBdh-4 foi conseguida de 0,1 a 2,0 mM de IPTG e depois de 2 a 6 H de indu??o. A maior produ??o da rBdh-4 (P