Detec??o de Listeria monocytogenes pela técnica de PCR em leite contaminado artificialmente.

摘要

Avaliou-se a técnica de PCR como op??o para reduzir o tempo de detec??o de Listeria monocytogenes no leite. Para tanto, amostras de leite desnatado esterilizado e de leite cru integral - com baixa, média e alta contagem de microrganismos aeróbios mesófilos - foram inoculadas experimentalmente com diversas concentra??es de L. monocytogenes. Os resultados da rea??o de PCR foram comparados com os da cultura da amostra empregando-se metodologia padronizada tradicional. N?o se detectou L. monocytogenes pela rea??o de PCR quando esta foi realizada a partir do caldo de enriquecimento de Listeria (LEB) após 24 horas de incuba??o, nem no leite desnatado esterilizado, nem no leite cru integral. Após 48 horas de enriquecimento em LEB, a bactéria foi detectada por PCR nas amostras de leite desnatado esterilizado, com a sensibilidade de 1UFC/mL, mas n?o nas amostras de leite cru integral. Pela metodologia tradicional, a bactéria foi recuperada de todos os ensaios. Entretanto, nas amostras de leite cru com altas contagens de aeróbios mesófilos, a sensibilidade da metodologia tradicional foi reduzida (a partir de 7UFC/mL). Melhores resultados foram obtidos quando a rea??o de PCR foi feita utilizando-se DNA obtido diretamente da col?nia suspeita em meio sólido (Oxford e Palcam). Foi possível substituir os testes fenotípicos de identifica??o de L. monocytogenes pela técnica de PCR reduzindo-se o tempo de identifica??o da bactéria de vários dias para algumas horas.