Estandarización de una técnica para la micropropagación de los helechos Platycerium bifurcatum Y Asplenium nidus (Polipodiaceae)

摘要

Se establecieron las condiciones de cultivo in vitro de los helechos cuerno de alce y nido de ave; realizando dos metodologías para incrementar el número de esporas: raspado y maceración de esporangios y variaciones en temperatura de 20, 30 y 45 oC para la liberación directa de hoja, con 15, 30, 45 min, de forma correspondiente. Para la desinfección se variaron los tiempos de inmersiónde 10, 15 y 20 min en hipoclorito de sodio al 5%. Previa inoculación se realizó el conteo en cámara de Newbauer, para determinar el número de células por mililitro siendo ésta de 500 para P. bifurcatum y 150 en A. nidus. El menor porcentaje de contaminación y viabilidad se obtuvocon inmersión con hipoclorito por 15 min. Aunque la incubación a mayor temperatura (45 oC) permitió mayor obtención de esporas, se obtuvo menor viabilidad. Las esporas fueron transferidas a medios Murashige Skoog (MS) base sin tiamina y MS suplementado con diversos compuestos: ácido 2,4-diclorofenoxiacético (MS1), bencilaminopurina (MS2) y ácido naftalenacético(MS3), en concentraciones entre 2,5 a 7,5 mg/L. La aparición de los primeros brotes para P. bifurcatum y A. nidus se observó en los tres y cuatro meses después de la siembra, los mejores resultados en brotación para P. bifurcatum corresponden a los medios: MS1 (2,5 y 5,0 mg/L), MS2 (5,0 y 7,5 mg/L) y MS3 (2,5, 5,0 y 7,5 y mg/L). Para A. nidus, los medios MS1 (2,5 y 7,5 mg/L) y MS3 (7,5 mg/L), mostraron los mejores resultados. Los brotes obtenidos fueron transferidos a medios MS líquido, sólido y semisólido, con resultados óptimos en medio líquido y MS con 1,0% de agar.