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【24h】

Avalia??o da fidelidade genotípica por marcadores RAPDs de brota??es de pereira (Pyrus communis L.) cv. Carrick, regeneradas in vitro

机译:用RAPD标记对梨(Pyrus communis L.)的基因型保真度进行评估。 Carrick,在体外再生

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摘要

O objetivo deste trabalho foi avaliar a fidelidade genotípica de brota??es de pereira (Pyrus communis L.) cultivar Carrick, regeneradas in vitro, utilizando marcadores RAPDs. O DNA gen?mico foi extraído de folhas oriundas das brota??es de pereira regeneradas a partir de diferentes tratamentos e de plantas matrizes micropropagadas (planta controle), utilizando-se o protocolo descrito por FERREIRA & GRATTAPAGLIA (1996). Para triagem dos primers foram utilizados os kits OPAN, OPA e OPF (Operon Technologies, Inc.) e, destes, foram escolhidos sete primers: OPAN-03, OPAN-14, OPAN-15, OPAN-16, OPA-02, OPA-08 e OPF-04. A separa??o dos produtos da amplifica??o foi realizada através de eletroforese horizontal em gel de agarose 1,2%, corado com brometo de etídio. Após a corrida, os géis foram visualizados sobre um transiluminador de luz ultravioleta e fotografados com camara Polaroid para registro dos dados. A ausência ou adi??o de uma ou mais bandas comparativamente ao padr?o da planta matriz (planta controle) foi considerado varia??o somaclonal. Dos 66 fragmentos produzidos pelos sete primers, observou-se 100% de bandas monomórficas, indicando que nenhum dos primers utilizados detectou varia??o somaclonal nas brota??es regeneradas.
机译:这项工作的目的是评估使用RAPD标记在体外再生的梨品种Carrick的基因型保真度。使用FERREIRA&GRATTAPAGLIA(1996)所述的方案,从不同处理方法再生的梨芽和微繁基质植物(对照植物)的叶子中提取基因DNA。为了筛选引物,使用了OPAN,OPA和OPF试剂盒(Operon Technologies,Inc.),并从中选择了7种引物:OPAN-03,OPAN-14,OPAN-15,OPAN-16,OPA-02,OPA -08和OPF-04。扩增产物的分离使用水平电泳在1.2%琼脂糖凝胶上进行,并用溴化乙锭染色。比赛后,将凝胶在紫外线透射仪上可视化,并用宝丽来相机拍照以记录数据。与基质植物(对照植物)的模式相比,不存在或不添加一个或多个条带被认为是体细胞克隆变异。在这七个引物产生的66个片段中,观察到100%单态性条带,表明所用引物均未检测到再生芽中的体细胞克隆变异。

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