Evaluation of terpolymers of 2-hydroxyethyl methacrylate, dodecyl methacrylate and ethylene glycol dimethacrylate as matrices for hydrophobic interaction chromatography

摘要

Polymer matrices were prepared by suspension polymerization of 2-hydroxyethyl methacrylate, dodecyl methacrylate and ethylene glycol dimethacrylate. It was shown that porosity decreased with the addition of monomers with hydrophobic side chains. Trypsin, bovine serum albumin and lipase served as standard proteins in sor-bent hydrophobicity evaluation. Isocratic chromatography at various ionic strengths revealed different elution behaviours. Some sorbents exhibited an ion-exchange mode in the whole range of ionic strength variation. Some others showed a hydro-phobic interaction character when the salt concentration exceeded a critical value. It is suggested to take this critical salt concentration as a relative measure of hydrophobicity for particular protein-matrix-salt systems. It was shown that the matrix containing 90 μmol/g of dodecyl methacrylate was enough hydrophobic to differentiate proteins and thus could be used effectively for hydrophobic interaction chromatography of proteins.%Durch Suspensionspolymerisation von 2-Hydroxyethylmethacrylat, Dodecyl-methacrylat und Ethylenglycoldimethacrylat wurden Polymermatrices hergestellt. Es wird gezeigt, daß die Porosität durch Zugabe von Monomeren mit hydrophoben Seitenketten abnimmt. Trypsin, Rinderserumalbumin und Lipase dienten als Proteinstandards zur Bewertung der Sorbentienhydrophobie. Isokratische Chromatographie bei verschiedenen Ionenstärken offenbarte unterschiedliches Elutionsverhalten. Für einige Sorbentien wird über den gesamten Bereich der Ionenstärkevariation ein Ionenaustauschmodus beobachtet, während andere beim Überschreiten einer kritischen Salzkonzentration einen hydrophoben Wechselwirkungscharakter aufwiesen. Es wird vorgeschlagen, diese kritische Salzkonzentration als relatives Maß für die Hydrophobie der einzelnen Protein-Matrix-Salz-Systeme zu verwenden. Es wird gezeigt, daß die mit 90 μmol/g Dodecylmethacrylat in der Monomerenmischung hergestellte Matrix ausreichend hydrophob ist zur Trennung der Proteine und somit bei der Hydrophobchromatographie von Proteinen wirksam einsetzbar sein sollte.