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mMaple: A Photoconvertible Fluorescent Protein for Use in Multiple Imaging Modalities

机译:mMaple:一种可光转换的荧光蛋白,可用于多种成像方式

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摘要

Recent advances in fluorescence microscopy have extended the spatial resolution to the nanometer scale. Here, we report an engineered photoconvertible fluorescent protein (pcFP) variant, designated as mMaple, that is suited for use in multiple conventional and super-resolution imaging modalities, specifically, widefield and confocal microscopy, structured illumination microscopy (SIM), and single-molecule localization microscopy. We demonstrate the versatility of mMaple by obtaining super-resolution images of protein organization in Escherichia coli and conventional fluorescence images of mammalian cells. Beneficial features of mMaple include high photostability of the green state when expressed in mammalian cells and high steady state intracellular protein concentration of functional protein when expressed in E. coli. mMaple thus enables both fast live-cell ensemble imaging and high precision single molecule localization for a single pcFP-containing construct.
机译:荧光显微镜的最新进展已将空间分辨率扩展到纳米级。在这里,我们报告了一种工程化的光转换荧光蛋白(pcFP)变体,命名为mMaple,适用于多种常规和超分辨率成像模式,特别是宽视野和共聚焦显微镜,结构照明显微镜(SIM)和单分子定位显微镜。我们通过获取大肠杆菌中蛋白质组织的超分辨率图像和哺乳动物细胞的常规荧光图像来证明mMaple的多功能性。 mMaple的有益特征包括当在哺乳动物细胞中表达时绿色状态的高光稳定性和当在大肠杆菌中表达时功能蛋白的高稳态细胞内蛋白浓度。因此,mMaple可以对单个包含pcFP的构建体进行快速活细胞集合成像和高精度单分子定位。

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