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Multiplexed expression and screening for recombinant protein production in mammalian cells

机译:哺乳动物细胞中重组蛋白生产的多重表达和筛选

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摘要

BackgroundA variety of approaches to understanding protein structure and function require production of recombinant protein. Mammalian based expression systems have advantages over bacterial systems for certain classes of protein but can be slower and more laborious. Thus the availability of a simple system for production and rapid screening of constructs or conditions for mammalian expression would be of great benefit. To this end we have coupled an efficient recombinant protein production system based on transient transfection in HEK-293 EBNA1 (HEK-293E) suspension cells with a dot blot method allowing pre-screening of proteins expressed in cells in a high throughput manner.
机译:背景技术多种用于理解蛋白质结构和功能的方法需要产生重组蛋白质。基于哺乳动物的表达系统在某些种类的蛋白质上具有优于细菌系统的优势,但可能更慢且更费力。因此,提供用于生产和快速筛选用于哺乳动物表达的构建体或条件的简单系统将是非常有益的。为此,我们将高效的重组蛋白生产系统与基于斑点印迹法的HEK-293 EBNA1(HEK-293E)悬浮细胞中的瞬时转染相结合,从而可以以高通量方式对细胞中表达的蛋白质进行预筛选。

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