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Locus-specific DNA methylation analysis of retrotransposons in ES somatic and cancer cells using High-Throughput Targeted Repeat Element Bisulfite Sequencing

机译:使用高通量靶向重复元素亚硫酸氢盐测序的ES体细胞和癌细胞逆转录转座子的基因座特异性DNA甲基化分析

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摘要

DNA methylation is a major epigenetic mark associated with multiple aspects of retrotransposons within the mammalian genome. In order to study DNA methylation of a large number of retrotransposons on an individual-locus basis, we have developed a new protocol termed High-Throughput Targeted Repeat Element Bisulfite Sequencing (HT-TREBS) (Ekram and Kim, 2014 [1]). We have used this technique to characterize the locus-specific patterns of DNA methylation of 4799 members of the mouse IAP LTR (Intracisternal A Particle Long Terminal Repeat) retrotransposon family in embryonic stem, somatic and Neuro2A cells (Bakshi and Kim, 2014 [2]). Here we describe in detail the sample preparation and bioinformatics analyses used for these studies. The somatic cell data may be accessed under GEO accession number . The ES and Neuro2A data are deposited under GEO accession number .
机译:DNA甲基化是与哺乳动物基因组内反转录转座子的多个方面相关的主要表观遗传标记。为了研究单个位点上大量逆转录转座子的DNA甲基化,我们开发了一种新的协议,称为高通量靶向重复元素亚硫酸氢盐测序(HT-TREBS)(Ekram和Kim,2014 [1])。我们已使用该技术表征了胚胎干细胞,体细胞和Neuro2A细胞中小鼠IAP LTR(脑池内A颗粒长末端重复序列)逆转座子家族的4799个成员的DNA甲基化的特定位点模式(Bakshi和Kim,2014 [2] )。在这里,我们详细描述了用于这些研究的样品制备和生物信息学分析。可以以GEO登录号访问体细胞数据。 ES和Neuro2A数据存放在GEO登录号下。

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