产ESBL肺炎克雷伯菌16SrRNA甲基化酶分布与耐药性研究

摘要

目的探讨产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株16SrRNA甲基化酶基因分布以及与耐药谱的关系。方法采用PCR法检测苍南县人民医院临床分离出的69株非重复产ESBL肺炎克雷伯菌中的16SrRNA甲基化酶基因（rmt B和arm A）,通过DNA测序,确定ESBL基因及整合子基因;质粒接合试验和质粒消除试验确定16SrRNA甲基化酶基因传播途径,ERIC-PCR技术进行基因分型。结果 69株产ESBL肺炎克雷伯菌rmt B阳性菌20株（28.99%）,其中2株同时携带有rmt B和arm A。20株检测rmt B阳性株均携带有CTX-M基因,14株为CTX-M-14基因,6株为CTX-M-15基因;14株携带TEM-l基因;8株携带SHV基因中,5株SHV-12基因,3株SHV-11基因;3株携带OXA-10基因;3株携带VBE-1基因。另有12株携带有intl阳性,含有5种不同耐药基因盒,分别携带drf A25、drf A1、drf A12、aad A1、aad A2、sat和blaVEB-1基因。ERIC-PCR法显示20株16SrRNA甲基化酶基因阳性的肺炎克雷伯菌主要分为5型,A型为优势克隆菌株。质粒接合和消除试验发现A型克隆株KP5和KP16 rmt B均位于一质粒上并通过接合传播。结论产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株中普遍存在16SrRNA甲基化酶基因rmt B,导致对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药。rmt B通过水平基因传播和克隆传播两种方式进行播散,并且存在同时产ESBLs、16SrRNA甲基化酶和I类整合子肺炎克雷伯菌传播。