应用拉曼光谱技术优选人类发育潜力胚胎研究

摘要

目的建立应用拉曼光谱技术优选具有发育潜力胚胎的实验方法。方法选取100份用于囊胚培养的第3天卵裂期胚胎培养液（D3培养液）,确定合适的测定时间,获得原始拉曼光谱,通过滤波、基线校正和光谱归一化预处理,获得真实拉曼光谱和用于分析比较的光谱模型。测定173份D3培养液拉曼光谱曲线,评估其优选发育潜力胚胎的应用价值。结果采用≥240 s的光谱仪积分时间可获得分辨度较好的原始拉曼光谱,预处理后获得的真实拉曼光谱的特征性位移为942、1 346、1 456和1 656 cm-1。阳性曲线和阴性曲线模型的光谱差异位于1 100~1 800 cm-1。不同位移的真实拉曼光谱强度比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。173份D3培养液获得阳性曲线80份,阴性曲线70份,中性曲线23份,囊胚形成率依次为85.00%、22.86%和65.22%,差异有统计学意义（P＜0.001）。拉曼光谱曲线预测囊胚形成效率的灵敏度为83.8%,特异度为73.0%,Kappa值为0.572。结论通过改良光谱收集条件,并对原始拉曼光谱进行预处理,可获得清晰、真实、可比性好的拉曼光谱模型,采用本方法筛选的潜力胚胎与囊胚形成呈中度一致。