黄芪皂苷改善膝关节骨性关节炎大鼠模型炎症及其机制研究

摘要

目的探讨黄芪皂苷对膝关节骨性关节炎(OA)的作用及其潜在的分子机制。方法取60只Wistar大鼠,采用关节腔内注射单碘乙酸盐(MIA)建立大鼠膝关节OA模型,按照随机数字表法分为对照组、OA-1组、OA-5组、OA-10组、OA-20组和OA-28组,每组10只。对照组关节腔内单次注射40μl 0.9%氯化钠注射液;OA-1组、OA-5组、OA-10组、OA-20组和OA-28组大鼠关节腔内单次注射4 mg MIA(溶于40μl 0.9%氯化钠注射液中)。另取30只Wistar大鼠按照随机数字表法分为OA组、OA+0.9%氯化钠注射液组(下称OA+生理盐水组)和OA+黄芪皂苷组,每组10只。OA+黄芪皂苷组大鼠皮下注射0.5 ml/(kg·d)黄芪皂苷;OA+生理盐水组大鼠每天皮下注射0.5 ml 0.9%氯化钠注射液;OA组大鼠不予任何药物处理;干预28 d。采用Western blot法检测上述各组大鼠膝关节软骨组织中蛋白激酶A(PKA)/环状单磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路相关蛋白[PKA、磷酸化PKA(p-PKA)、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)]、炎症相关蛋白(TNF-α、IL-6和IL-1β)表达水平。采用免疫组化染色法检测上述各组大鼠膝关节软骨组织中CREB表达水平。结果与对照组比较,OA-28组大鼠CREB水平下调(P<0.05),并且均值最低。与对照组比较,OA-1组、OA-5组、OA-10组、OA-20组和OA-28组大鼠膝关节软骨组织中PKA、p-PKA、CREB和p-CREB蛋白表达水平均降低,TNF-6、IL-6和IL-1β蛋白表达水平均增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与OA+生理盐水组比较,OA+黄芪皂苷组大鼠膝关节软骨组织中PKA、p-PKA、CREB、p-CREB蛋白表达水平均增加,TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪皂苷可以通过激活PKA/CREB信号通路抑制OA大鼠炎症相关蛋白的表达,进而发挥抗炎活性。