绞股蓝总苷对缺氧/复氧小鼠海马HT22细胞PAK1、CREB表达及凋亡的影响

摘要

目的 探讨绞股蓝总苷(Gyp)对缺氧/复氧(O/R)小鼠海马HT22细胞p21活化蛋白激酶1(PAK1)、环磷酸腺苷反应单元结合蛋白(CREB)表达及凋亡的影响.方法 将小鼠海马HT22细胞分为正常对照组、O/R组、70 mg/L Gyp O/R组、85 mg/L Gyp O/R组和100 mg/L Gyp O/R组后,4组细胞建立O/R模型.观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;Western blot法测定各组B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PAK1、CREB蛋白表达水平.结果 正常对照组细胞贴壁生长,细胞膜光滑、完整,胞体折光性强,细胞突触明显,突触之间相互交织成网状;O/R组细胞贴壁不紧,细胞膜皱缩,胞质凝聚,细胞胞体突触明显减少,细胞间连接大量减少;70 mg/L Gyp O/R组、85 mg/L Gyp O/R组、100 mg/L Gyp O/R组细胞上述现象依次缓解.与正常对照组相比,O/R组细胞凋亡率、Bax、Bax/Bcl-2蛋白表达水平均升高(均P<0.05),Bcl-2、PAK1、CREB蛋白表达水平均降低(均P<0.05);与O/R组相比,70 mg/L Gyp O/R组、85 mg/L Gyp O/R组、100 mg/L Gyp O/R组细胞凋亡率、Bax、Bax/Bcl-2蛋白表达水平依次降低(均P<0.05),Bcl-2、PAK1、CREB蛋白表达水平依次升高(均P<0.05).结论 Gyp可能通过上调小鼠海马HT22细胞PAK1、CREB蛋白表达水平来抑制细胞凋亡.