柴胡加龙骨牡蛎汤作用难治性癫痫多药转运体的机制研究

摘要

探讨柴胡加龙骨牡蛎汤通过环氧化酶(Cyclooxygenase,COX-2)/前列腺素2(Prostaglandin 2,PGE2)-腺苷作用难治性癫痫多药转运体的机制研究。选取60只模型构建成功实验小鼠,观察各组小鼠在戊四氮PTZ(Pentylenetetrazole)点燃过程中癫痫发作情况,并通过苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察小鼠海马皮层形态结构;分离培养小鼠海马星形胶质细胞,Real-time PCR检测相关基因表达;构建PTZ慢性点燃癫痫小鼠模型,不同剂量柴胡加龙骨牡蛎汤灌服,统计小鼠癫痫发作情况,并通过Real-time PCR检查小鼠脑内相关基因表达。与野生型组相比,敲除组小鼠死亡率、点燃率和发作持续时间增加(P<0.05),而点燃潜伏时间和发作开始时间下降(P<0.05);HE染色显示,敲除组小鼠海马皮层出现小胶质细胞增生和肿胀,神经细胞坏死和异常。小鼠海马星形胶质细胞Real-time PCR发现,与对照组相比,模型组中COX-2、PEG2、磷酸羟乙酸磷酸酶(Phosphoglycollate phosphatase,PGP)和多药耐药蛋白(Multidrug resistant protein,MRP1)均上调表达(P<0.05),而柴胡加龙骨牡蛎汤处理后呈剂量依赖下调表达(P<0.05)。动物模型实验表明,与模型组相比,柴胡加龙骨牡蛎汤灌服后小鼠癫痫发作次数、平均发作时间和发作级别呈剂量依赖下降(P<0.05);小鼠脑内Real-time PCR结果与小鼠海马星形胶质细胞中表达一致。总之,本研究通过观察PTZ慢性点燃癫痫模型小鼠癫痫发作情况及脑组织病理改变,探讨柴胡加龙骨牡蛎汤的抗癫痫作用及其与COX-2/PGE2-腺苷系统通路的关系。