Detection of PERV by polymerase chain reaction and its safety in bioartificial liver support system

摘要

瞄准：为了建立在中国试验性的微型猪检测猪的内长的制动火箭病毒(PERV ) 的一个方法并且在三评估 PERV 的安全，个人们基于猪的 hepatocytes 与简历 artificial 肝支持系统对待。方法：猪的 hepatocytes 与二阶段的灌注方法被孤立，在生物反应器然后有教养，它被半渗透的膜(0.2 microm ) 与病人的血浆通过被传播的腔分开。在 post-hemoperfusion 以后，病人的血为屏蔽被获得。另外，媒介的样品从实验室生物反应器的管腔内、额外的钠分隔空间收集了，文化上层清液在试管内被分析。病毒的序列的存在被聚合酶链反应(PCR ) 和反向的 transcriptase 聚合酶链反应(RT-PCR ) 估计。最后，在普通文化的上层清液的病毒的感染被暴露查明到胎儿的肝细胞。结果：PERV 特定作呕序列用 RT-PCR 在猪的 hepatocytes 被发现。并且从管腔内的、额外的钠样品和文化上层清液在所有样品被检测。然而，从主要猪的 hepatocytes 的文化上层清液(细胞的碎片变清) 没能感染人的胎儿的肝细胞。最后， RT-PCR 没检测感染在在各种各样的时间 post-hemoperfusion 从三个病人获得的血样品被发现的 PERV。结论：使用的试金特定、敏感，由第二 PCR 识别了。没有 mitogen 的刺激， PERV 能被免除在生物反应器有教养的 hepatocytes 并且不能被空纤维阻止半渗透的膜，显示在身体外的简历 artificial 肝的 PERV 安全的存在支持系统(EBLSS ) 。