黑老虎带芽茎段的组织培养及快速增殖

摘要

【目的】为黑老虎的工厂化育苗及遗传转化研究提供参考。【方法】以大田培养和温室盆栽的黑老虎带芽茎段为外植体,比较不同消毒方式对黑老虎带芽茎段消毒效果的影响,研究不同植物生长调节剂浓度配比下外植体的腋芽诱导和增殖效果,找到适合培养黑老虎带芽茎段的最佳培养基。【结果】各处理中大田黑老虎带芽茎段的消毒效果均较差,腋芽成活率均为0。剪掉大田黑老虎地上部分的茎段,然后移栽到花盆中,放在温室内培养,待新梢长出后,取半木质化的带芽茎段作为组织培养的外植体,这样可以解决黑老虎外植体消毒难的问题。适宜的黑老虎带芽茎段消毒方法为75%酒精浸泡2 min+0.1%HgCl_(2)浸泡处理45 min,采用该方法消毒后污染率可以控制在18.5%之内,腋芽诱导率可达59.8%。适宜的黑老虎带芽茎段初代培养基配方为1/2 MS+2.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L IAA,在该培养基上腋芽诱导率可达46.2%;最佳继代增殖的培养基配方为1/2 MS+3.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L 3-IBA,在该培养基上腋芽增殖系数可达8.5。【结论】以温室盆栽植株的带芽茎段作为外植体,可显著降低污染率,提高腋芽萌发率;消毒后的带芽茎段经过初代培养及继代增殖培养后,可以得到生长健壮的黑老虎无菌苗。