nm23-H1基因对Tca8113的转移能力及化疗敏感性影响的实验研究

摘要

目的通过nm23-H1的转化及导入Tca8113细胞株,建立稳定、高效、低毒的转染方法,观察nm23-H1对Tca8113细胞株侵袭转移能力的影响.方法 利用基因转化技术,制备高纯度的nm23-H1真核表达质粒.利用阳离子脂质体介导的转染技术,完成转染方法的建立.利用免疫组化技术,检测转染前后的nm23-H1的蛋白产物核苷二磷酸激酶A (NDPKA)的表达.利用transwell小室和冲刷实验,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化.MTT法观察nm23-H1对Tca8113化疗敏感性影响.结果 使用重组的pCMV-Neo-Bam真核表达载体,将nm23-H1转染口腔癌细胞,并获得稳定表达.Tca8113细胞株nm23-H1基因转染前后表达水平有明显差异,转染后Tca8113细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低,转染前后Tca8113细胞株对阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、甲氨喋呤(MTX)的化疗敏感性无显著差异,转染后Tca8113细胞株对顺铂(CDDP)明显增敏.结论 nm23-H1对Tca8113细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用,nm23-H1可能通过特异性地影响细胞内的能量交换过程来达到对CDDP化疗增敏的效果.