雌激素受体拮抗剂对人子宫内膜样癌Ishikawa细胞增殖的影响及可能的作用机制

摘要

目的 :探讨雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂[他莫昔芬(tamoxifen,TAM)和氟维司群(fulvestrant或ICI-182780)]对高分化人子宫内膜样癌Ishikawa细胞增殖的影响,以及可能的作用机制。方法 :体外培养Ishikawa细胞,实验分为6组:TAM、ICI-182780、β-雌二醇(β-estradiol)单药组以及TAM、ICI-182780联合β-雌二醇组,以未用任何药物处理的Ishikawa细胞作为对照组。采用MTT法检测细胞的增殖情况,分别在光学显微镜和电子显微镜下观察细胞形态的变化,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测细胞中p57^(kip2)以及cyclin E m RNA和蛋白的表达情况。结果 :与对照组相比,TAM组细胞的增殖能力稍有增强(P>0.05),其余各组细胞的增殖能力均有减弱(P值均<0.05);与β-雌二醇组相比,TAM组、β-雌二醇+TAM组细胞的增殖能力增强,而ICI-182780组、β-雌二醇+ICI-182780组细胞的增殖能力减弱(P值均<0.05)。与对照组相比,β-雌二醇+ICI-182780组细胞密度明显减少,其余各组细胞则无明显变化;各实验组细胞表面微绒毛均有减少,TAM组和β-雌二醇组中仅有个别细胞出现内质网轻度肿胀,ICI-182780组出现部分细胞内质网中度肿胀,β-雌二醇+TAM组和β-雌二醇+ICI-182780组中多数细胞内质网和线粒体明显肿胀,自噬现象增多。与对照组相比,TAM组中p57^(kip2) m RNA和蛋白的表达水平均有所下调,cyclin E m RNA和蛋白的表达水平则被上调,在其余各组中p57^(kip2)m RNA和蛋白的表达水平均被有所上调,cyclin E m RNA和蛋白的表达水平均被下调;与β-雌二醇组相比,在ICI-182780组和β-雌二醇+ICI-182780组中p57^(kip2) m RNA和蛋白的表达水平均有上调,cyclin E m RNA和蛋白的表达水平均为下调,在TAM组和β-雌二醇+TAM组中p57^(kip2) m RNA和蛋白的表达水平均为下调,cyclin E m RNA和蛋白的表达水平则为上调。结论:ICI-182780可抑制Ishikawa细胞的增殖,而TAM则微弱促进Ishikawa细胞增殖,ICI-182780和TAM对子宫内膜样癌的作用并不完全一致。这可能与ICI-182780能上调抑癌基因p57^(kip2)表达,下调癌基因cyclin E表达;TAM则是微弱下调p57^(kip2)表达,上调cyclin E表达有关。ICI-182780可能比TAM更适合子宫内膜样癌患者的内分泌个体化治疗。