TGM1基因过表达可抑制乳腺癌细胞的上皮-间质转化

摘要

目的 :探究转谷氨酰胺酶1(transglutaminase 1,TGM1)基因过表达对乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法 :采用实时荧光定量PCR法检测鼠源性乳腺癌FE1.2和FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平。采用脂质体法将携带有TGM1基因全长序列的重组载体质粒p CMV3-TGM1-GFPspark转染至FE1.2细胞中,构建TGM1基因过表达的FE1.2细胞株(FE1.2-TGM1)。光学显微镜下观察FE1.2细胞形态的变化,FCM法测量细胞粒径的大小;MTT法检测TGM1基因过表达对鼠乳腺癌细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测EMT相关分子标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、β-链蛋白(β-catenin)以及细胞周期调节蛋白D1(cyclin D1)m RNA和蛋白的表达水平。最后,采用细胞划痕愈合实验检测TGM1过表达对细胞迁移能力的影响。结果 :FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平明显高于FE1.2细胞(P0.05),β-catenin m RNA的表达水平无明显变化(P>0.05),β-catenin蛋白的表达水平明显下调(P<0.01);TGM1过表达后FE1.2细胞的迁移能力明显减弱(P<0.05)。结论 :TGM1基因过表达能抑制乳腺癌细胞的EMT。