微管相关蛋白Nur77在前列腺癌转移中的作用及其机制的探讨

摘要

目的:分析Nur77在前列腺癌中表达的临床意义,并探讨其影响前列腺癌细胞迁移的作用机制。方法:采用免疫组织化学法检测72例前列腺癌和24例前列腺增生组织中Nur77蛋白的表达情况,并分析Nur77蛋白表达与前列腺癌临床病理特征的关系。采用免疫荧光法检测Nur77与β-tubulin在前列腺癌PC-3细胞质中的共定位情况,并通过免疫共沉淀技术验证二者是否存在相互作用。采用脂质体法将pcDNA3.1-Nur77、Nur77△DBD、Nur77△TUBD及Nur77-shRNA分别转染PC-3细胞。分离提取聚合与解聚微管蛋白,采用蛋白质印迹法检测Nur77对微管聚合及解聚的影响;采用Transwell小室法检测Nur77对前列腺癌细胞迁移能力的影响。结果:前列腺癌组织中Nur77蛋白表达水平明显高于前列腺增生组织（P＜0.01）。在前列腺癌组织中,随着N分期、M分期及Gleason评分的升高,Nur77蛋白的表达水平呈下降趋势（P值均＜0.05）。Nur77与β-tubulin蛋白共定位于PC-3细胞质中,并相互结合。与空白对照组相比,pcDNA3.1-Nur77和Nur77△DBD组的聚合/游离（polymerized/soluble,P/S）微管蛋白量的比值增高,而细胞迁移数减少（P值均＜0.05）;Nur77-shRNA组P/S值降低,细胞迁移数增多（P值均＜0.05）。结论:Nur77抑制前列腺癌PC-3细胞迁移可能依赖其促进微管聚合的功能。