延龄草皂苷通过NF-κB/MAPK信号通路调控MMPs表达并抑制骨肉瘤Saos-2细胞的迁移和侵袭

摘要

目的 :观察延龄草皂苷（diosgeninglucoside,Dgg）对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :应用不同浓度（6.25~100μmol/L）的Dgg处理骨肉瘤Saos-2细胞96 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况。用不同浓度（12.5~50μmol/L）的Dgg作用骨肉瘤Saos-2细胞24 h后,分别采用FCM和Transwell小室法检测细胞凋亡、迁移和侵袭能力的变化。最后,采用蛋白质印迹法检测Dgg（12.5和25μmol/L）作用后,Saos-2细胞中核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）/丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路相关蛋白以及该通路下游效应分子基质金属蛋白酶（matrix metalloproteases,MMPs）的表达水平。结果 :Dgg可明显抑制骨肉瘤Saos-2细胞的增殖,诱导细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭（P值均＜0.05）,并呈浓度和时间依赖性。Dgg下调NF-κB信号通路中p38的磷酸化（P＜0.05）,但不影响细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）的磷酸化（P值均＞0.05）。Dgg抑制MAPK通路中磷酸化核因子κB激酶抑制蛋白（phospho-inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,p-IKK）、磷酸化核因子κB抑制蛋白α（phospho-inhibitor of nuclear factor kappa-Bα,p-IκBα）、IκBα和磷酸化p65（phospho-p65,p-p65）的表达（P值均＜0.05）,并下调下游效应分子MMP-1、MMP-2和MMP-9的表达水平（P值均＜0.05）。结论 :Dgg可抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。这一作用可能与肿瘤细胞中NF-κB/MAPK信号通路被阻滞,以及MMPs表达被下调有关。