Wnt抑制剂IWR-1抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖和迁移

摘要

目的 :探讨Wnt抑制剂IWR-1-endo（简称:IWR-1）对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和迁移的影响,及可能的机制。方法 :用不同浓度的IWR-1（2、4、8和16μmol/L）处理MG-63细胞,CCK-8法检测IWR-1对MG-63细胞增殖的抑制率;FCM法检测MG-63细胞的周期及凋亡率;划痕愈合实验观察对MG-63细胞迁移能力的影响;实时荧光定量PCR法检测β连环蛋白（β-catenin）和cyclinD1mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测轴抑制蛋白1（axis inhibition protein 1,AXIN1）、β-catenin、磷酸化β-catenin和cyclin D1蛋白的表达水平。结果 :IWR-1对MG-63细胞的增殖抑制率随着药物浓度的提高和作用时间的延长而增强（P值均＜0.01）。MG-63细胞周期呈现明显的G0/G1期阻滞（P值均＜0.05）,细胞凋亡率随着药物浓度的增加而显著升高（P值均＜0.01）。IWR-1可明显降低划痕愈合率（P值均＜0.01）,可引起MG-63细胞内β-catenin和cyclinD1mRNA和蛋白表达水平下调（P值均＜0.01）,而使AXIN2和磷酸化β-catenin蛋白的表达水平上调（P值均＜0.01）。结论 :IWR-1可以抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖及迁移,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来实现的。