采用GenoType MTBDR plus检测技术快速检测结核分枝杆菌耐药性的研究

摘要

目的评价GenoType MTBDR plus方法[线性探针杂交技术（HAIN技术）中的一种方法，以下简称“HAIN技术”]检测深圳地区结核分枝杆菌菌株耐药性的临床应用能力。方法采用HAIN技术检测2014-2016年深圳市耐药监测项目（来自于深圳市慢性病防治中心及深圳市各区慢性病防治院）的1140株临床菌株的耐药性，以传统药物敏感性试验（简称“药敏试验”）的比例法（简称“比例法药敏试验”）作为对照，评价HAIN技术检测耐药的能力。分别利用McNemar检验对检测效果进行评价，敏感度和特异度对检测结果真实性进行评价，阳性预测值和阴性预测值对检测方法应用价值进行评价，以及利用Kappa检验对两种方法检测结果的一致性进行评价。结果比例法药敏试验检测结果为异烟肼耐药123例，利福平耐药75例，耐多药52例；HAIN技术检测异烟肼耐药120例、利福平耐药79例、耐多药52例，两种检测方法比较差异均无统计学意义（McNemar检验，P值分别为0．250、0．219、1．000）。以比例法药敏试验结果为标准，HAIN技术检测异烟肼耐药的敏感度和特异度分别为97．6％（120／123）和100．0％（1017／1017），阳性预测值和阴性预测值分别为100．0％（120／120）和99．7％（1017／1020），Kappa值为0．986；检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为98．7％（74／75）和99．5％（1060／1065），阳性预测值和阴性预测值分别为93．7％（74／79）和99．9％（1060／1061），Kappa值为0．958；检测耐多药的敏感度和特异度分别为96．2％（50／52）和99．8％（1086／1088），阳性预测值和阴性预测值分别为96．2％（50／52）和99．8％（1086／1088），Kappa值为0．960。HAIN技术检测利福平耐药基因rpoB出发生频率最高的突变是野生型条带8缺失及S531L位点突变（58．7％，44／75），其次是野生型条带7缺失及H526Y位点突变（10．7％，8／75），以及单纯野生条带2缺失（10．7％，8／75）；异烟肼耐药基因突变频率最高的是katG的野生条带1缺失及S315T1位点突变（70．8％，85／120），其次是inhA的野生条带1缺失及C15T位点突变（18．3％，22／120）。结论HAIN技术是一种快速检测耐药结核病的诊断方法，对耐异烟肼和耐利福平有较高的敏感度和特异度，可用于临床结核病耐药的快速检测。