凝胶成像系统SDS-PAGE法测定乳及乳制品中乳铁蛋白

摘要

为了建立一种检测市场上乳及乳制品中的乳铁蛋白含量的简便方法——SDS-PAGE法,采集了10种液态奶、4种奶酪、3种乳清蛋白粉、4种酸奶和4种奶粉,利用SDS-PAGE法分离乳铁蛋白,并优化了分离胶的浓度、电压、上样量和染色方法。经优化的SDS-PAGE法的操作条件为:分离胶浓度为12%,浓缩胶电压为120V,分离胶电压为200V,改良的考马斯亮蓝染色,乳铁蛋白标准品的点样浓度为0.1111mg/mL,点样量为12μL。采用此电泳条件分离不同乳及乳制品中的乳铁蛋白,运用凝胶成像系统测得乳铁蛋白含量的相对标准偏差小于10%,且测得的含量均高于其检出限和定量限。同一样品同一块胶,同一样品不同凝胶乳铁蛋白的含量相对标准偏差小于10%,说明利用本方法得到的实验结果准确度高,重复性好。