目的:建立稳定表达乙型肝炎病毒 X 基因肝细胞株。方法对含酶切位点 EcoRⅠ、HindⅢ的 X 基因序列进行 PCR 扩增,构建 HBVx 基因质粒(pcDNA3.1(+)-HBVx),利用转基因技术将 X 基因转入正常肝细胞构建稳定表达 X 基因的细胞株。结果 X 基因亚克隆入 pcDNA3.1(+),有完整的X 基因片段,转入正常肝细胞获得稳定表达 X 基因的细胞株,转染 C57BL/6正常肝细胞有 HBVx mRNA 表达,且C57BL/6/HBVx 有 HBV 蛋白表达。结论成功构建稳定表达乙型肝炎病毒 X 基因肝细胞株。
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