体积调节性氯离子通道阻滞剂NPPB对低渗条件下小胶质细胞活化的影响

摘要

目的 探讨体积调节性氯离子通道(volume regulated anion channel,VRAC)阻滞剂NPPB(5-nitro-2-3-phenylpropylamino benzoic acid)对低渗状态下小胶质细胞活化的影响及机制.方法 采用小胶质细胞系BV2细胞,分为对照组 、低渗组 、低渗+NPPB干预组,低渗+U0126组,通过LDH试剂盒检测NPPB对BV2细胞的毒性作用;采用免疫荧光技术和FITC标记鬼笔环肽染色检测BV2细胞形态变化及细胞面积;western blot检测BV2细胞MAPK信号通路的变化.结果 50μmol和100μmol的NPPB对BV2细胞无明显毒性作用.与对照组比较,低渗干预后BV2细胞迅速由静息状态下的分支状转变为活化的阿米巴状,IBA1表达显著增加,细胞面积显著增大;NPPB显著逆转低渗条件下BV2细胞形态变化,减少IBA1表达及细胞面积(P0.05),NPPB显著降低BV2细胞p-Erk蛋白表达水平(P<0.05);Erk选择性抑制剂U0126干预后低渗状态下BV2细胞的面积显著减小(P<0.05).结论 低渗条件可诱导BV2细胞活化,VRAC阻滞剂NPPB可抑制低渗诱导的BV2细胞活化,Erk信号通路可能参与了VRAC介导的BV2细胞活化.