风寒咳喘方调控IL-1β水平成分的筛选和同时测定

摘要

目的 筛选出风寒咳喘方中的IL-1β调控活性成分并进行含量同时测定,以建立更为贴近药效机制的质量评价方法.方法 根据文献报道选择方中各药味所含化学成分单体,均配置为25μg·mL-1的单体溶液,加入A549细胞中进行孵育,使用ELISA法测定IL-1β水平;根据测定结果,选择具有明显调控作用的成分(盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷和紫菀酮),进而配制不同浓度的上述化合物单体溶液(12.5、25、50μg·mL-1),测定IL-1β水平考察量效关系;上述成分均通过测试后,将其选为指标成分,建立HPLC同时测定方法,测定10批风寒咳喘方的含量,根据结果最终确定活性成分.结果 风寒咳喘方各药味所含化学成分中,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷和紫菀酮具有明显的IL-1β调控活性,且在12.5～50μg·mL-1浓度范围内,活性与剂量呈明显相关性;含量测定结果显示,除紫菀酮未检出外,其余三种成分的含量分别为1.030～1.499 mg·mL-1、0.729～0.892 mg·mL-1、0.728～1.032 mg·mL-1.结论 风寒咳喘方对IL-β水平有明显调控作用,产生该功效的主要化学成分为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、苦杏仁苷和紫菀酮.