吲哚基二聚体菁类探针同步荧光测定蛋白质的研究

摘要

基于蛋白质对双嵌吲哚染料具有良好的荧光增强作用,以新型水溶性吲哚基同型二聚体探针Ⅰ,建立了一种灵敏的蛋白质同步荧光分析体系.实验考察了吲哚探针的荧光特征、吲哚探针浓度、缓冲体系pH、盐浓度等参数对体系荧光的影响.在酸性条件下,蛋白质分子与探针Ⅰ发生结合作用,同步荧光明显增强并向长波方向发生红移,且同步荧光强度与蛋白质浓度成良好的线性关系.在最优条件下,牛血清白蛋白BSA的线性响应范围5.00×10-7～2.50×10-5g·mL-1,检测限(3σ/K)为3×10-8g·mL-1;测定了血清蛋白BSA的合成样品,不同浓度BSA样品回收率为98.6%～103.0%,相对标准偏差1.1%～1.9%;与蛋白质紫外标准测定法比较,测定偏差为0.4%～3.9%.