夏黑葡萄VlTFL1A基因酵母单杂交文库构建及其上游基因的筛选

摘要

[目的]VlTFLlA是葡萄3个TFL基因之一,该基因在葡萄花序形成过程中发挥重要作用.筛选WTFL1A启动子上游的调控因子,为研究该基因在调控葡萄成花中的机理奠定基础.[方法]由VlTFL1A的启动子构建诱饵融合载体,转化酵母细胞构建诱饵菌株.运用SMART技术构建葡萄酵母单杂交cDNA文库,再共转化诱饵菌株,筛选VlTFL1A启动子上游的调控因子.[结果]筛选出大于500 bp的9个阳性克隆,经测序和Blast同源性分析,作用在VlTFL1A启动子上游的调控因子分别为:信号识别受体亚基、钙调蛋白相关蛋白、转酮醇酶、木葡聚糖糖基转移酶、F-box蛋白、冠毒素不敏感基因1(COI1)、UV-B诱导蛋白、重金属相关的异戊二烯蛋白39等8个蛋白和一个未知功能的蛋白.[结论]筛选出的作用在VlTFL1A启动子上游的9个调控因子在葡萄花序形成过程中的功能尚未见报道,为进一步研究VlTFL1A基因的表达调控机制提供了候选蛋白.