南酸枣ISSR-PCR反应体系的建立及优化

摘要

以南酸枣叶片基因组DNA为模板，采用单因子实验方法对影响ISSR反应体系的dNTP、Mg2＋、引物浓度、模板DNA、Taq酶等5个因子进行优化，结果表明，在20 L ISSR反应体系中，各反应物的最适含量为：2.5 mmol/L Mg2＋、0.2 mmol/L dNTP、0.25～0.5 mol/L引物、20 ng DNA和0.5 U Taq聚合酶。利用该优化体系扩增85条ISSR引物，有65条有扩增产物，38条具有多态性，并且利用842引物扩增不同南酸枣DNA模板，扩增的目的条带清晰、多态性好、稳定性强，可以用于后期的南酸枣种质资源鉴定及遗传多样性研究。