福寿螺细胞色素P450基因CYP3192A1的克隆与表达分析

摘要

文章分析了福寿螺（Pomacea canaliculata）细胞色素P450（CYPs）的结构、表达特征及四聚乙醛代谢与细胞色素P450表达水平的相关性。应用c DNA末端快速扩增技术（rapid amplification of c DNA ends,RACE）克隆获得福寿螺CYPs基因c DNA全长2 523 bp,命名为CYP3192A1,含1个开放阅读框（ORF）,编码517个氨基酸,具有血红素结合区F＊＊G＊＊＊C＊G、K螺旋（E＊＊R）、I螺旋（AG＊ET）、C螺旋（W＊＊＊R）等高度保守序列及跨膜螺旋（12～34号氨基酸）。聚类分析显示福寿螺CYP3192A1是细胞色素P450新家族成员,与CYP3A亚家族序列同源性较高。荧光定量PCR（real time quantitative PCR,RT-q PCR）分析显示,福寿螺CYP3192A1基因表达量存在显著的性别及组织差异性（P〈0.05）,表现为雌性表达量高于雄性,肠和鳃表达量最丰富,肝和胃次之,心和腹足中少量表达;四聚乙醛对福寿螺CYP3192A1表达的影响为＂低浓度诱导,高浓度诱导期缩短并提前＂。结果表明四聚乙醛处理能够显著诱导福寿螺CYP3192A1表达,与CYP3192A1表达量增加紧密相关,福寿螺CYP3192A1过表达可能在四聚乙醛代谢抗性中起重要作用。