基于CRISPR/Cas9技术敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响

摘要

目的 利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO技术构建核因子E2相关因子1(NFE2L1)缺失的肺癌A549细胞,并观察NFE2L1敲除对肺癌A549细胞增殖的影响.方法 利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO基因编辑技术,将重组NFE2L1-gRNA表达载体转入肺癌A549细胞,嘌呤霉素筛选NFE2L1缺失的肺癌A549细胞,并通过DNA测序和Western Blot实验验证获得的A549细胞.采用CCK8和克隆形成实验观察敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响.结果DNA测序和Western Blot实验结果表明,成功获得稳定敲除NFE2L1的肺癌A549细胞.CCK8和克隆形成实验均表明敲除NFE2L1促进肺癌A549细胞的增殖.结论 利用CRISPR/Cas9-2hitKO技术成功构建NFE2L1缺失的A549细胞,敲除NFE2L1能够促进肺癌细胞增殖.