AK078438基因功能的初步研究

摘要

目的 初步研究AK078438基因的功能.方法 用已制备的AK078438抗体为一抗,对小鼠心、肝、脾、肺、肾组织进行免疫组织化学(Immunochistochemistry)检测各组织中该基因的表达情况.检测到肾脏组织中表达该基因之后,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)技术,从小鼠肾脏中提取总RNA,并以之为模板,扩增出AK078438基因.构建绿色荧光表达载体,转染内皮细胞,MTT以及Hoechst荧光染色检测该基因对细胞凋亡的影响.结果 免疫组织化学结果显示在小鼠的肾脏组织中检测到该基因表达.RT-PCR得到全长为1065 bp的AK078438基因,并成功构建了p-EGFP-AK078438质粒,MTT以及Hochest33258荧光染色检测结果表明该基因的过表达有促进内皮细胞凋亡的作用.结论 AK基因在肾脏组织中呈阳性表达,并有促进内皮细胞凋亡的作用,为进一步深入研究该基因功能提供了实验基础.