基于细胞的钙离子荧光探针试验评价——含表面活性剂化妆品的眼刺激性

摘要

建立基于细胞的钙离子荧光探针试验(Cell-based Ca2+Fluorescent Probe Assay,CCFPA),用于评价表面活性剂或含表面活性剂化妆品产品/配方的眼刺激性.在96孔板中接种细胞,2 d后用钙离子荧光探针Fluo-4,AM加载SH-SY5Y细胞30 min,然后用KRH缓冲液稀释的不同浓度的受试物处理细胞,用荧光酶标仪检测孔板中的荧光信号,最后分析评价细胞膜完整性或细胞裂解情况,进而评价受试物的眼刺激性.以十二烷基硫酸钠(SDS)为例,建立基于细胞的钙离子荧光探针试验,其EC50值为105.6μmol/L.对10款婴儿/儿童洗发沐浴露进行评价,其中7款为无/轻刺激,3款为中度刺激,0款为重度刺激;分类结果与鸡胚绒毛尿囊膜试验(HET-CAM)相比,具有70%一致性.对3款成人洗发水进行评价,3款均为重度刺激.基于细胞的钙离子荧光探针试验可较好地评价含表面活性剂化妆品的眼刺激性.