重组巨细胞病毒多肽检测特异性IgG抗体及抗体亲合力指数的评价

摘要

目的 探讨大肠杆菌重组巨细胞病毒(CMV)多肽是否适合于检测CMV特异性IgG抗体以及IgG抗体亲合力指数(AI).方法 利用分子克隆技术克隆CMV的pp150、pp28、pp52和gB这4种基因,大肠杆菌分别表达这些基因,重组蛋白多肽纯化后,建立检测特异性IgG抗体的ELISA方法,与进口ELISA试剂盒同时检测126例CMV IgG阳性和74例CMV IgG阴性血清.根据重组抗原ELISA检测CMV IgG的结果,选取阳性和阴性符合率均相对较高的重组抗原pp150/2、pp150/3和pp150/4,进一步检测8例明确原发感染的婴幼儿血清、7例确定为潜在感染的儿童血清的CMV IgG AI,并与进口试剂检测结果比较.结果 制备了8种CMV重组抗原,包括pp150/1、pp150/2、pp150/3、pp150/4、pp28、pp52/1、pp52/2和gB.与进口试剂盒相比,检测CMV IgG抗体时重组抗原pp150/4的阳性符合率最高(90.9％),其次为多肽pp150/3(89.7％)、pp150/2(88.9％)和pp150/1(80.2％).与进口ELISA试剂盒比较,重组多肽pp150检测CMV IgG抗体的阳性率差异无统计学意义(P均>0.05).8例经进口试剂确定为原发感染血清的AI值为15.3％～29.8％;以重组抗原pp150/4检测时,4例AI值30％(39.0％～60.4％),与进口试剂检测值比较差异有统计学意义(P均<0.05).7例明确为潜在感染的血清进口试剂AI值为59.6％～92.3％,2例经重组抗原检测AI值分别为22.9％和25.1％,与进口试剂检测结果比较差异有统计学意义(P均<0.05).同样,利用重组抗原pp150/2和pp150/3检测的IgG AI值与进口试剂盒检测值比较差异有统计学意义(P均<0.05).结论 重组多肽pp150具有良好的抗原性,可用于检测CMV IgG抗体,但不适合于CMV IgG AI检测.