长链非编码RNA CYTOR靶向调控miR-206对结肠癌细胞生物学行为的影响

摘要

cqvip:目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)CYTOR靶向调控微小RNA-206(miR-206)对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法选择结肠癌患者30例,收集结肠癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CYTOR、miR-206表达,并分析结肠癌组织中CYTOR表达与miR-206表达的关系。取传2代、对数生长期、生长状态良好的结肠癌LoVo细胞,随机分为CYTOR组与对照1组、miR-206组与对照2组,分别转染CYTOR shRNA与阴性对照shRNA、miR-206 mimics与阴性对照miRNA,采用RT-qPCR法验证转染效率。收集各组转染后细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力。通过StarBase数据库(http://starbase.sysu.edu.cn/index.php)确定CYTOR和miR-206的结合位点。将人胚肾上皮HEK-293T细胞接种于12孔板中,随机分为pMIR-CYTOR-wt+miR-206 mimics组、pMIR-CYTOR-wt+阴性对照miRNA组、pMIR-CYTOR-mut+miR-206 mimics组、pMIR-CYTOR-mut+阴性对照miRNA组,相应转染pMIR-CYTOR-wt、pMIR-CYTOR-mut、miR-206 mimics、阴性对照miRNA,采用双荧光素酶报告基因实验检测各组转染后荧光素酶活性。结果结肠癌组织CYTOR相对表达量明显高于癌旁正常组织,miR-206相对表达量明显低于癌旁正常组织(P均0.05。结论CYTOR通过靶向抑制miR-206表达促进结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移。