超促排卵方法制备围绝经期大鼠模型

摘要

cqvip:目的观察超促排卵方法(枸橼酸氯米芬CC灌胃)制备围绝经期大鼠模型的可行性。方法 30只SD大鼠随机分为5组,每组6只,分别为A、B、C、D、E组。从动情间期开始,A、B组大鼠连续2 d于同一时间分别灌胃枸橼酸氯米芬(CC) 5、10 mg/kg,C组大鼠连续2 d在同一时间腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG) 40 IU [1],D组大鼠连续2天于同一时间灌胃生理盐水2 mL。A、B、C、D组均间隔2 d后重复同样操作,共重复12个周期。E组为去势对照组,戊巴比妥钠麻醉后开腹剪去两侧卵巢。A、B、C、D组从适应性饲养1周后开始,直至12个周期给药结束后30 d,每日进行阴道脱落细胞涂片,E组在去势术后15 d开始连续15天行阴道脱落细胞涂片,HE染色后光镜下观察并记录各组动情周期所处阶段。A、B、C、D组给药结束后15 d腹主动脉采血,E组于去势手术30 d后取腹主动脉血,ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡成熟素(FSH)、卵巢功能储备(AMH)。腹主动脉采血结束后处死各组大鼠,取双侧卵巢组织,HE染色后镜下观察各组大鼠卵巢组织病理形态。结果 A组4只大鼠动情期、动情周期均延长,B组可见动情后期、动情期或动情间期的延长,以动情后期延长为主,C组主要表现为动情间期和动情后期的延长,以及动情周期逻辑顺序的改变,D组大鼠动情周期仍规律地出现,E组去势组呈持续动情间期。与D组比较,A、B组血清AMH水平均降低( P 均<0.05);与E组比较,A、B、C组血清E2水平均降低( P 均<0.05),D组血清E2水平降低,FSH升高( P 均<0.05);与C组比较,B组血清FSH水平降低( P <0.05)。A、B组的卵巢可见生长卵泡、成熟卵泡及黄体,相比于D组,成熟卵泡数、黄体数较少,颗粒细胞层次较少;C组卵巢可见成熟卵泡及黄体,相比于D组,黄体数较多,颗粒细胞层次较少,血管较少;D组卵巢可见各级生长卵泡、成熟卵泡及黄体,黄体发育好,颗粒细胞层次多,卵泡液丰富,血管丰富。结论 超促排卵方法(5、10 mg/kg的CC灌胃)可成功制备围绝经期大鼠模型。