肺癌细胞特异性结合肽的体内筛选及初步鉴定

摘要

目的 筛选能与肺癌细胞特异性结合的多肽并初步鉴定其亲和力和特异性.方法 用人肺癌细胞 A549使裸鼠致瘤,尾静脉注射肽库.取荷瘤鼠的肿瘤组织,用体内噬菌体展示技术进行筛选;经过3轮体内筛选,获得在肿瘤组织中富集的噬菌体;利用 ELISA和细胞免疫化学 DAB染色法初步鉴定各克隆亲和力、特异性;对阳性克隆行DNA测序,利用生物信息学对此多肽进行分析、比对.结果 随机挑选的 10个单克隆中,8个均对 A549细胞具有较高亲和力,其中 3号克隆亲和力最高,其可特异性结合肺癌细胞A549 和 NCI-H1299,且对A549的亲和力强于NCI-H1299.DNA测序结果显示该序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI) GenBank DNA序列数据库和 Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性.结论 筛选出了能与肺癌细胞特异性结合的多肽.