肺炎衣原体抗体的制备及应用

摘要

目前检测肺炎衣原体(Cpn)抗原所用单抗主要依赖进口,价格昂贵。近期,笔者尝试用家兔自制抗Cpn抗体并用于临床,现将结果报告如下。材料与方法:①兔抗Cpn抗体的制备:用10μl Cpn菌株TW-183(2×108ifu)与300μl福氏完全佐剂混匀后皮下多点注射新西兰白兔(NZW),在第14、28和42天,用10μlCpn菌株与300μl福氏不完全佐剂混匀后皮下多点注射NZW,用双向琼脂扩散法鉴定其抗血清效价>1∶64后,颈动脉插管放血55 m l,分离出血清25 m l,用硫酸铵盐析法、DE-AE-Sephadex-50层析法逐步纯化兔免疫球蛋白(IgG),用考马斯亮蓝法测其蛋白含量为3.45 mg/m l;Cpn抗体与沙眼衣原体—脂多糖(LPS)抗原无交叉反应。②Cpn抗体荧光素结合物(FITC-Cpn-PcAb)制备:将纯化的IgG抗体用pH值9~9.5碳酸盐缓冲液透析过夜,配制异硫氰酸荧光素(FITC)-二甲亚砜(DMSO)溶液,使终质量浓度为1 mg FITC/1 m lDMSO。按50μg FITC/1 mg IgG比例将FITC-DMSO溶液逐滴加入透析后的抗体溶液中。标记物用pH值9~9.5碳...