山奈酚联合骨髓间充质干细胞治疗溃疡性结肠炎小鼠的疗效及机制

摘要

目的观察山奈酚联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗溃疡性结肠炎小鼠的疗效并探讨其机制。方法3周龄雄性C57BL/6J小鼠处死后提取BMSCs,12只6周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组、造模组、造模与山奈酚治疗组以及造模与山奈酚联合BMSCs治疗组,每组3只。对照组小鼠自由饮用正常灭菌双蒸水,其余3组小鼠自由饮用含3%葡聚糖硫酸钠的灭菌双蒸水建立溃疡性结肠炎模型,造模与山奈酚治疗组、造模与山奈酚联合BMSCs治疗组小鼠同时给予每日山奈酚灌胃,造模与山奈酚联合BMSCs治疗组在造模第1天、第4天和第7天尾静脉注射提取的BMSCs,其余组小鼠灌注同样量的溶解剂。造模结束后10 d,每天测量小鼠体质量,10 d后取出小鼠结肠,测量小鼠结肠长度。采用流式细胞术检测小鼠结肠组织辅助性T淋巴细胞(Th17)、调节性T淋巴细胞(Treg)比例,ELISA法检测小鼠血浆白细胞介素17A(IL-17A)、IL-10,RT-qPCR法检测小鼠结肠组织IL-17A、IL-10 mRNA。采用HE染色观察小鼠结肠黏膜组织病理学改变,免疫组织化学染色观察小鼠结肠组织肠上皮紧密连接蛋白occludin及ZO-1表达情况。结果结肠长度对照组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>造模与山奈酚治疗组>造模组(P均造模与山奈酚治疗组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>对照组,结肠组织Treg比例对照组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>造模与山奈酚治疗组>造模组(P均造模与山奈酚治疗组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>对照组,IL-10表达对照组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>造模与山奈酚治疗组>造模组(P均<0.05)。HE及免疫组化染色结果显示,与造模组比较,造模与山奈酚治疗组、造模与山奈酚联合BMSCs治疗组结肠黏膜组织损伤程度减轻,肠上皮紧密连接蛋白occludin及ZO-1表达增加,且造模与山奈酚联合BMSCs治疗组对结肠黏膜组织损伤的改善作用更加明显。结论山奈酚联合BMSCs治疗溃疡性结肠炎小鼠能够提高疗效,其机制可能与调节Th17/Treg平衡以修复肠道上皮屏障有关。