异牛肝菌素对人胃癌细胞生物学特性的影响及机制

摘要

目的探讨异牛肝菌素对人胃癌细胞(SGC-7901)生物学特性的影响及机制。方法取对数生长期SGC-7901细胞,用2.83、5.66和11.32μmol/L异牛肝菌素分别作用于SGC-7901细胞,设为异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组和异牛肝菌11.32μmol/L组,异牛肝菌0μmol/L组仅加入等容量生理盐水。CCK-8法检测SGC-7901细胞增殖,流式细胞术检测SGC-7901细胞凋亡,Transwell检测SGC-7901细胞侵袭,细胞划痕实验检测细胞迁移,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,采用Real-time PCR法检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin mRNA表达,Western blotting法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达,流式细胞术检测活性氧(ROS)水平。结果与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组细胞增殖、侵袭、迁移、克隆形成能力低(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,增殖、侵袭、迁移、克隆形成能力逐渐降低(P均<0.05);与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组细胞凋亡率高(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,凋亡率逐渐升高(P均<0.05);与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组E-cadherin mRNA表达高(P均<0.05),N-cadherin、Vimentin mRNA表达低(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,E-cadherin mRNA表达逐渐升高(P均<0.05),N-cadherin、Vimentin mRNA表达逐渐降低(P均<0.05);与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组ROS荧光强度、p-PI3K、p-Akt蛋白表达高(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,ROS荧光强度、p-PI3K、p-Akt蛋白表达逐渐升高(P均<0.05)。结论异牛肝菌素可调控SGC-7901增殖、凋亡、侵袭、迁移、克隆形成能力,并呈剂量依赖性;其机制可能是通过ROS-PI3K/Akt信号通路间接发挥其抑制SGC-7901上皮-间充质转化的作用。