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RNA干扰PCGF4/Bmi-1抑制白血病K562细胞系增殖

             

摘要

目的:利用RNAi方法针对PCGF4/Bmi-1基因,抑制其在慢性髓性白血病K562细胞中的过表达,观察K562细胞的增殖性改变.方法:RT-PCR检测PCGF4/Bmi-1基因在K562中的表达情况.利用Invitrogen公司RNAi慢病毒表达载体系统,构建针对PCGF4/Bmi-1基因慢病毒RNAi表达载体.转染K562细胞,瞬时干扰PCGF4/Bmi-1基因的表达,实时定量PCR检测干扰前后基因表达变化.利用生长曲线测定干扰载体转染前后细胞生长速度变化.结果:PCGF4/Bmi-1慢病毒RNAi表达载体成功地构建,并建立瞬时干扰PCGF4/Bmi-1基因的K562细胞系.实时定量PCR检测,PCGF4/Bmi-1基因在K562细胞系中过表达被显著抑制.生长曲线测定,PCGF4/Bmi-1基因干扰后细胞增殖明显变慢.结论:干扰PCGF4/Bmi-1基因,降低该基因表达后能明显减低细胞的生长速度.

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