虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ的化学合成及其结构与生理活性分析

摘要

应用芴甲氧羰基（Fmoc）固相方法化学合成了虎纹捕鸟蛛毒素-I,合成采用Fmoc氨基酸五氟苯酯,各侧链保护措施如下:羧基和酚羟基用叔丁基（tBu）保护,赖氨酸和组氨酸侧链用叔丁氧羰基（Boc）保护,精氨酸胍基用4-甲氧-2,3,6-三甲基苯磺酰基（Mtr）保护,半胱氨酸巯基用三苯甲基（Trt）保护.固相载体为需活化的乙二胺-聚乙二醇-聚苯乙烯（EDA-PEG-PS）树脂.合成产物（肽树脂）用苯甲硫醚-乙二硫醇-苯甲醚-三氟乙酸系统一步裂解以及去除侧链保护基,然后用二硫苏糖醇（DTT）还原,再通过氧化型和还原型谷胱甘肽系统促使其形成正确的二硫键配对.对HPLC分离纯化得到的合成产物,进行了氨基酸组成、肽谱、氨基酸顺序以及一维核磁共振谱分析.分析结果表明合成毒素具有与天然毒素相同的化学结构和空间构象.生理实验结果表明,其生物学活性与天然Huwentoxin-I也相同.