抗禽流感病毒免疫相关基因的筛选与鉴定

摘要

[目的]研究抗禽流感病毒免疫的分子机制,发现新的抗禽流感病毒免疫相关基因,为抗禽流感转基因育种的研究奠定基础.[方法]随机选取40只30日龄从白羽肉鸡,其中20只鸡注射禽流感H5亚型禽流感灭活疫苗,另20只未注射疫苗鸡作为对照,在注射后第9天取脾脏保存在液氮中.应用mRNA差异显示技术,结合反向northern dot blot鉴定技术,来筛选注射疫苗组和未注射疫苗组的差异表达基因.[结果]筛选出13条差异表达EST,其中未注射疫苗组4条,注射组9条表达量增高.应用BLAST工具将EST对核酸数据库nr和dbEST中所有序列进行了同源性分析.DD3、DD4、DD6、DD9、DD11、DD12与已有核酸数据库中的基因克隆或EST具有较高相似性,为已知的EST,但功能未知.DD10,DD13与鸡核糖体蛋白L7a基因具有很高的相似性.DD1、DD2、DD5,DD8为新的EST,提交到GenBank,分别获得登录号为EB714185,EB714186,EB714187、EB714188.[结论]本研究筛选出的鸡核糖体蛋白L7a基因和其它EST对应的未知功能基因可以作为抗禽流感病毒研究中的候选基因,其具体的功能有待今后进一步研究.