重组着床丝氨酸蛋白酶-2(ISP2)在昆虫细胞中的表达

摘要

目的:利用昆虫细胞表达着床丝氨酸蛋白酶-2(implantation serine proteinase-2,ISP2).方法:将ISP2 cDNA克隆入核型多角体病毒(AcNPV)非融合蛋白基因表达载体pVL1392,获得的重组表达载体pVL1392/ISP2,与BaculGoldTM线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞Sf9,经多次扩增后获得高滴度的重组病毒AcNPV-ISP2.将此重组病毒感染昆虫细胞,收集转染细胞培养上清液.结果:用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blot测得培养上清液中有表达蛋白,分子量为40kD左右.结论:用杆状病毒系统表达的ISP2能分泌到细胞外,有利于产物的分离纯化,为进一步研究ISP2在着床中的生物功能奠定了基础.