人胎盘间充质干细胞移植通过降低超氧化物歧化酶1和解耦联蛋白-2的表达提高卵巢功能

摘要

目的探讨人胎盘间充质干细胞（hPMSC）移植治疗对环磷酰胺所致卵巢早衰（POF）模型SD大鼠超氧化物歧化酶1（SOD1）和解耦联蛋白-2（UCP-2）表达的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为4组（n=15）:空白对照组,POF模型组,治疗对照组,hPMSC移植组。以首计量50 mg/kg、维持剂量8 mg/kg连续14 d给大鼠腹腔注射环磷酰胺溶液建立POF模型,观察大鼠动情周期变化,采用ELISA方法测定血清中雌二醇（E2）、促卵泡生成素（FSH）、抗苗勒氏管激素（AMH）、活性氧族（ROS）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平;HE染色方法检测卵巢组织形态学及卵泡计数,VG染色法观察卵巢组织纤维化情况;采用免疫组织化学和Western blotting法测定SOD1和UCP-2蛋白表达。结果 ELISA结果显示:模型组血清FSH水平[（10.60±1.0） IU/L]明显高于空白对照组[（5.83±0.92） IU/L]（P＆0.01）,而E2、AMH水平[（35.52±10.27） ng/L、（2 090.6±397.5） ng/L]则明显低于空白对照组[（65.62±3.76） ng/L、（3 636.39±204.46） ng/L],差异有统计学意义（P＆0.01）。与空白对照组相比hPMSC移植组血清中ROS和8-OHdG升高（P＆0.05）。卵泡计数显示hMSC移植组闭锁卵泡数（5.36±1.11）显著低于治疗对照组（8.01±2.22）和POF模型组（11.21±1.69）（P＆0.05）。与治疗对照组相比,hPMSC移植组中ROS和8-OHdG显著下降（P＆0.05）。VG染色显示,与治疗对照组比,hPMSC移植组纤维化面积比例显著降低（P＆0.05）。Western blotting结果显示,与治疗对照组相比,hPMSC移植组中SOD1和UCP-2蛋白表达量显著下降（P＆0.05）,而hPMSC移植组与对照组则差异无统计学意义（P＆0.05）;免疫组织化学结果显示模型组中SOD1和UCP-2蛋白表达相较于治疗对照组是降低的,而hPMSC移植组相较于空白对照组则差异无统计学意义。结论 hPMSC移植改善POF模型SD大鼠氧化应激,降低SOD1及UCP-2表达,起到保护卵巢线粒体功能的作用。