自制染色干燥细胞外基质胶羊膜生物学特性及修补结膜缺损的实验研究

摘要

目的 研究自制染色干燥细胞外基质胶羊膜(extracellular matrix amniotic membrane,ECM-AM)的生物活性因子表达情况、生物力学特征以及在兔结膜修补术中的应用效果.方法 使用光镜和HE染色对自制染色干燥ECM-AM进行形态学观察,并通过免疫荧光染色对比其与单纯冻干羊膜中不同生物活性因子Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ的表达情况.利用负荷传感器对比自制染色干燥ECM-AM与单纯冻干羊膜的最大承受拉伸力、弹性模量和拉伸长度,且把保存12个月的自制染色干燥ECM-AM应用于兔羊膜-结膜修补术,并在术后2周观察兔结膜愈合情况.结果 自制染色干燥ECM-AM可以分辨羊膜的折叠处、皱褶及边缘,HE染色表明自制染色干燥ECM-AM基底膜的完整度和厚度均优于保存相应天数(12个月)的冻干羊膜.保存12个月的自制染色干燥ECM-AM中Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ均比单纯冻干羊膜要高.自制染色干燥ECM-AM的最大承受拉伸力以及弹性模量均明显高于于单纯冻干羊膜(均为P＜0.05),但二者平均拉伸长度上差异无统计学意义(P＞0.05).自制染色干燥ECM-AM常温保存12个月后应用于兔羊膜-结膜修补术,术后2周羊膜上有兔结膜上皮长入且K19分布于整个结膜上皮细胞,并无明显的排斥反应和炎症反应.结论 自制染色干燥ECM-AM含有丰富的生物活性因子,具有优越的生物力学特性,为眼表重建提供了更加安全有效的材料.