脑源性神经营养因子(BDNF)对高糖环境下视网膜Müller细胞的保护作用

摘要

目的 探讨脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)对高糖环境下视网膜Müller细胞的保护作用.方法 该研究实验分为3组,对照组、高糖组(对照组中添加25 mmol·L-1葡萄糖)、BDNF组(高糖组添加100 mg·L-1BDNF),实验干预24h后,在倒置显微镜下观察各组细胞形态和生长状态,并进行各项指标检测.用倒置荧光显微镜观察各组视网膜Müller细胞的生长状态并检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度;流式细胞仪检测视网膜Müller细胞凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达情况.结果 与对照组相比,高糖组Müller细胞生长状态差,细胞突起减少,细胞失去原有形态,由原来的不规则形变为类圆形,折光性增强;而BDNF组与对照组相比无明显差异;与高糖组相比,BDNF组细胞生长状态明显改善,细胞突起增多,细胞折光性减弱.与对照组相比,高糖组Müller细胞内ROS含量显著升高(P＜0.01),BDNF组细胞内ROS含量亦升高(P＜0.01);与高糖组相比,BDNF组ROS含量显著减少(P＜0.01).与对照组相比,高糖组细胞凋亡率显著升高(P＜0.01),BDNF组凋亡率仍高于对照组(P＜0.01);与高糖组相比,BDNF组凋亡率明显减少(P＜0.01).与对照组相比,高糖组Bcl-2蛋白相对表达量显著减少,Bax蛋白相对表达量明显升高,Bcl-2/Bax二者比值降低(P＜0.01),BD-NF组与对照组相比相对表达量差异无统计学意义(P＞0.05);与高糖组相比,BDNF组Bcl-2蛋白相对表达量明显升高,Bax蛋白表达减少,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.01).结论 高糖环境能诱导视网膜Müller细胞凋亡,而给予外源性BDNF能够显著抑制高糖环境诱导的视网膜Müller细胞凋亡,对视网膜Müller细胞起到保护作用.